最近搜索:細(xì)胞培養(yǎng) 微生物學(xué) 分子生物 生物化學(xué)
首頁>>生化試劑>>染色劑/指示劑>>Viability/Cytotoxicity Assay for Bacteria Live & Dead? Cells
Viability/Cytotoxicity Assay for Bacteria Live & Dead? Cells
  • 產(chǎn)品貨號:
    BN16060
  • 中文名稱:
    Viability/Cytotoxicity Assay for Bacteria Live & Dead? Cells
  • 英文名稱:
    Viability/Cytotoxicity Assay for Bacteria Live & Dead? Cells
  • 品牌:
    Biorigin
  • 貨號

    產(chǎn)品規(guī)格

    售價

    備注

  • BN16060-100T

    100T

    ¥1920.00

產(chǎn)品描述

產(chǎn)品內(nèi)容:

image.png

儲存條件 -20℃ 避光保存,有效期見外包裝。 

光譜特性 NucGreen: Ex/Em: 503/530 nm (with DNA) EthD-III: Ex/Em: 530/620 nm (with DNA)

產(chǎn)品介紹 

Live & DeadTM Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Bacteria Cells 包含兩種熒光染料,NucGreen 是綠色核酸染料,可染色活細(xì)菌和死細(xì)菌;EthD-III 是紅色核酸染料,僅染色細(xì)胞膜受損的死細(xì)菌。將 NucGreen 和 EthD-III 適當(dāng)混用,具有完整細(xì)胞膜的細(xì)菌呈現(xiàn)綠色,而具有受損細(xì)胞膜的細(xì)菌在不同通道下可分別呈現(xiàn)綠色和紅色。 

細(xì)菌活力的常見標(biāo)準(zhǔn)是在合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基中繁殖的能力,稱為生長測定。本試劑盒通常與在液體或固體培養(yǎng)基中的生長測定結(jié)果有著很好的一致性。然而,在某些條件下,膜損傷的細(xì)菌可能會在營養(yǎng)培養(yǎng)基中恢復(fù)并繁殖,而這種細(xì)菌在本測定中會被認(rèn)定死菌。相反,一些具有完整膜的細(xì)菌可能無法在營養(yǎng)培養(yǎng)基中繁殖,但在本測定中會被認(rèn)認(rèn)定活菌。因此,若本試劑盒檢測結(jié)果和細(xì)菌生長測定之間有較大的差異,應(yīng)考慮上述可能。

實(shí)驗(yàn)方法 

以下實(shí)驗(yàn)方案以 Escherichia coli 為例: 

1. 在合適的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)菌至對數(shù)生長晚期。 

2. 向 EP 管中加入 1 mL 的菌液,5,000 ×g 離心 15 min。 

3. 去除上清液,加入 1 mL 的 0.85% NaCl 溶液重懸細(xì)菌。 

4. 5,000 ×g 離心 15 min,去除上清,加入 1 mL 的 0.85% NaCl 溶液重懸細(xì)菌。重復(fù)一次。 

5. 將菌懸液密度調(diào)整到 108 個細(xì)菌/ mL(OD670≈0.03)。 

6. 配制染色工作液:取 1 μL 的 NucGreen 和 2 μL 的 EthD-III,充分混勻后,加入 8 μL 的 0.85% NaCl 溶液。 

7. 取 1 mL 菌懸液,加 10 μL 的染色工作液。充分混合,室溫避光孵育 15 min。 

8. 染色結(jié)束后,取 10 μL 菌懸液滴加在帶有 18 mm 方形蓋玻片的載玻片上,盡快拍照,避免干片。 

9. 熒光顯微鏡成像。綠色熒光可使用 FITC 適用濾光片觀 察,紅色熒光可使用 PI 適用濾光片觀察。