貨號
產(chǎn)品規(guī)格
售價
備注
BN14050-200 μL
200 μL
¥400.00
產(chǎn)品描述
應(yīng)用范圍:細(xì)胞膜熒光染料、神經(jīng)元順行和逆行示蹤、細(xì)胞長期示蹤
產(chǎn)品參數(shù)
● NeuroDiO (C-4048) Ex/Em: 484/501 nm
● DiI (C-4049) Ex/Em: 549/565 nm
● DiD (C-4050)Ex/Em: 644/665 nm
圖. CytoMBrite Green, Orange , Red 的吸收光譜和發(fā)射光譜
貯存條件 4℃ 避光保存,保質(zhì)期 12 個月。
產(chǎn)品介紹
DiI, DiO 和 DiD 是一類親脂性碳菁類染料,能夠有效、穩(wěn)定地標(biāo)記質(zhì)膜及細(xì)胞內(nèi)膜結(jié)構(gòu)。它們具有細(xì)胞毒性低且不 會在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移的特性,常被作為細(xì)胞融合、粘附、遷移的 示蹤分子,與 PKH 類染料相比,CytoMBrite 染料使用方便、著色均勻。DiI(橙色熒光)、DiO(綠色熒光)、DiD(紅色熒光)和其它細(xì)胞膜熒光染料如 DiR(近紅外熒光)、NIR680 (遠紅外染料)配合使用,為多色成像和流式細(xì)胞分析提供了有效的工具。
CytoMBrite 系列染料也可以用于甲醛固定后細(xì)胞的染色,同時兼容在染色后的甲醛固定步驟。此系列染料不適用于細(xì)菌或酵母。
使用方法
工作液使用體積建議根據(jù)不同細(xì)胞系和實驗體系來優(yōu)化。建議從推薦量的 10 倍范圍內(nèi)開始最優(yōu)條件的摸索。
1. 懸浮細(xì)胞染色
(1)加入適當(dāng)體積的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,使其密度為 1×106/mL,再按 1:200 的比例加入染色原液。
(2)37℃孵育細(xì)胞 2~20 min,不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時間不同。可以 20 min 作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系。
(3)1000~1500 rpm 離心 5 min。傾倒上清液,再次緩慢 加入 37 ℃預(yù)熱的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。重復(fù)兩次。
2. 貼壁細(xì)胞的染色
(1)配制染色工作液:每 1 mL 培養(yǎng)基中加入 5 μL 的染色原液,渦旋混勻。
(2)將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上,培養(yǎng)結(jié)束后移出蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,但表面要保持濕潤。
(3)在蓋玻片的一角加入 100 μL 的染色工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。
(4)37℃孵育細(xì)胞 2~20 min,不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時間不同??梢?20 min 作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系。
(5)吸干染料工作液,用預(yù)溫的培養(yǎng)基洗蓋玻片 2~3 次, 每次 5~10 min,然后吸干培養(yǎng)基。注意保持表面濕潤。
3. 結(jié)果檢測 制備好的樣品可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測。
注意事項
1. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。