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產(chǎn)品規(guī)格
售價
備注
BN14014-5 mg
5 mg
¥2400.00
產(chǎn)品描述
應(yīng)用范圍:神經(jīng)熒光染料
產(chǎn)品參數(shù)
外觀:可溶于水的紅色固體
Abs/Em(in MeOH):510/625 nm
Abs/Em(in membranes):~480/600 nm
CAS 號:149838-22-2
貯存條件:4 ℃避光保存
保質(zhì)期:12 個月
分子式:C30H49Br2N3
分子量:612
結(jié)構(gòu)式:
產(chǎn)品介紹
神經(jīng)末梢探針是一系列陽離子型苯乙烯基熒光染料,用 于跟蹤神經(jīng)肌肉接頭或突觸的突觸活動。這類染料通常具有 親脂性尾部(兩個碳鏈)和帶陽離子的高親水性頭部。 NerveGreen 系列探針是具有單個雙鍵的染料。
陽離子苯乙烯基染料是通過活性依賴性染色突觸小泡 來發(fā)揮功能。染料與細(xì)胞或組織共孵育時,染料的水相部分 沒有熒光,而染料的親脂性尾部插入細(xì)胞膜并呈現(xiàn)強(qiáng)熒光。 神經(jīng)刺激后,在進(jìn)行胞吞作用時,染料被包裹在囊泡內(nèi),因 此,洗去細(xì)胞表面附著的染料后,熒光信號強(qiáng)弱表示新形成 的囊泡的數(shù)量的多少。反之,在胞吐作用時,染料與神經(jīng)遞 質(zhì)一起從囊泡釋放,導(dǎo)致熒光信號減少。因此,熒光強(qiáng)度的 變化反映了胞吞/胞吐或突觸活動的情況。內(nèi)吞過程中熒光 增加的速率——“結(jié)合速率”和胞吐過程中熒光減少的速率——“解離速率”因染料種類而異。通常,具有較長親脂性尾 部和更多雙鍵的染料對膜具有較高的親和力,因此具有較高 的結(jié)合速率和較低的解離速率。
NerveGreen C4(FM1-43)是一種廣泛使用的綠色熒光 染料,通過染色突觸的突觸囊泡或神經(jīng)肌肉接頭來跟蹤突觸 活動。結(jié)合使用紅色熒光染料 NerveRed,突觸和神經(jīng)肌肉 接頭可以獨立兩個顏色成像。
實驗操作
以下是蓋玻片上培養(yǎng)的神經(jīng)元細(xì)胞的神經(jīng)末梢染色方案。
神經(jīng)末梢染料也可用于標(biāo)記非神經(jīng)元細(xì)胞類型的內(nèi)吞囊泡。染色可以在 4℃進(jìn)行以選擇性標(biāo)記質(zhì)膜; 在室溫或 37℃下,染料的內(nèi)吞通常在 10 min 內(nèi)發(fā)生??梢允褂?Tyrode 溶液或其它緩沖液,可選擇性添加鈉離子通道阻斷劑河豚毒素(TTX),其目的是阻斷動作電位并防止染色后的突觸囊泡釋放。用于特定實驗的最佳方案需要由實驗者摸索。
1. 在 50 mM Tyrode 溶液中稀釋神經(jīng)末梢染料至最終濃度為 4 μM。在室溫下將含有細(xì)胞的蓋玻片置于該溶液中 1 min,使細(xì)胞完全浸沒。
2. 將蓋玻片轉(zhuǎn)移至 Tyrode + 0.5 μM 河豚毒素(TTX)溶液中,室溫下孵育 1 min。
3. 室溫下,用 Tyrode + 0.5 μM TTX 溶液反復(fù)多次洗滌蓋玻片。
4. 熒光顯微鏡下拍照觀察。
注意事項
1. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。