產(chǎn)品規(guī)格：1 mL 

應(yīng)用范圍：實(shí)時(shí)定量 PCR

儲(chǔ)存條件 

     本產(chǎn)品 4 ℃避光保存。使用前，將產(chǎn)品室溫下解凍，并輕輕渦旋混勻，解凍后所有實(shí)驗(yàn)應(yīng)在冰上操作。該產(chǎn)品避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品介紹 

     SYBR Green I 是一種結(jié)合于 dsDNA 雙螺旋小溝區(qū)域的具有綠色激發(fā)波長的熒光染料。SYBR Green I 與 dsDNA 結(jié)合熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng) 800-1000 倍，是一種常用的 qPCR 熒光染料。該染料經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、使用方便，具有高靈敏度，信噪比高等優(yōu)勢，可應(yīng)用于基因表達(dá)差異分析，基因芯片等。

使用方法： 

1. 建立如下實(shí)驗(yàn)體系：（僅供參考）

注：DNA 模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同種類的 DNA 模板中含有的靶基因的拷貝數(shù)不同，必要時(shí)可進(jìn)行梯度稀釋，確定合適的 DNA 模板添加量。cDNA 作為模板時(shí)的添加量不要超過 PCR 反應(yīng)液總體積的 10% 

2. 執(zhí)行實(shí)時(shí)定量 PCR 程序，采集熒光信號(hào)。

3. 分析數(shù)據(jù) 

注意事項(xiàng) 

     1. SYBR Green I 的使用濃度是保證熒光定量 PCR 實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素。染料濃度過低會(huì)使熒光信號(hào)變化降低，導(dǎo)致低拷貝的樣品可能無法檢出，而在高濃度時(shí)又會(huì)抑制 PCR 反應(yīng)。所以一般在使用 SYBR Green I 染料時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況 優(yōu)化使用濃度，反應(yīng)的終濃度為 1×到 0.2×之間。 

     2. 提高 Mg2+濃度可以降低 SYBR Green I 對 PCR 反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用 SYBR Green I 進(jìn)行熒光 PCR 反應(yīng)時(shí)， Mg2+濃度比無 SYBR Green I 的普通 PCR 反應(yīng)高出 0.5～3 mM。 

     3. 為了您的健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套進(jìn)行操作。