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植物基因組DNA提取試劑盒
  • 產(chǎn)品貨號(hào):
    BN12050
  • 中文名稱(chēng):
    植物基因組DNA提取試劑盒
  • 英文名稱(chēng):
    Plant DNA Extraction Kit
  • 品牌:
    Biorigin
  • 貨號(hào)

    產(chǎn)品規(guī)格

    售價(jià)

    備注

  • BN12050-50T

    50T

    ¥450.00

產(chǎn)品描述

保存條件 

      10~25℃保存 12 個(gè)月。 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介 

      本試劑盒采用高效結(jié)合核酸的離心柱配合獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),適合從 50~100 mg 普通植物中提取基 因組 DNA。試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù),提取過(guò)程中無(wú)需使用有毒的酚氯仿,整個(gè)提取過(guò)程只需 30~40 min,可最大限度去除植物組織中的雜質(zhì),提取的基因組 DNA 片段完整、純度高,可直接用 于下游 PCR 擴(kuò)增、qPCR、分子標(biāo)記以及文庫(kù)構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。 

產(chǎn)品特點(diǎn) 

  ? 操作簡(jiǎn)便:30~40 min 內(nèi)完成數(shù)個(gè)樣品的基因組 DNA 提取; 

  ? 安全低毒:無(wú)需酚、氯仿等有毒試劑; 

  ? DNA 純度高:提取的基因組 DNA 無(wú)雜質(zhì)殘留,適用于對(duì)純度、完整性要求很高的下游實(shí)驗(yàn)。

適用范圍 

       本產(chǎn)品適用于普通植物樣品的基因組 DNA 提取。 

注意事項(xiàng) 

   1. 第一次使用前應(yīng)在 Buffer GP3 和 Buffer GW2 中加入無(wú)水乙醇,加入量請(qǐng)參考瓶上標(biāo)簽; 

   2. 植物組織樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的基因組 DNA 片段小且得率低; 

   3. 使用前請(qǐng)檢查 Buffer GP1 和 Buffer GP2 是否出現(xiàn)結(jié)晶或者沉淀,如有沉淀,請(qǐng)置于 37℃水浴 溶解搖勻后使用;

   4. 本試劑盒所有離心操作均在室溫下進(jìn)行。 

使用方法 

   1. 取植物新鮮組織 50~100 mg 或干重組織 20 mg,加入液氮充分研磨。加入 400 μL Buffer GP1 和 6 μL RNase A(10 mg/mL),渦旋振蕩 1 min,室溫放置 10 min,使其充分裂解; 

   2. 加入 130 μL Buffer GP2,充分混勻,渦旋振蕩 1 min; 

   3. 12,000 rpm(~13,400×g)離心 5 min,將上清移至新的離心管中;

   4. 加入 1.5 倍體積的 Buffer GP3(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇)(例如 500 μL 上清液加入 750 μL Buffer GP3),立即振蕩 15 s 充分混勻,此時(shí)可能出現(xiàn)絮狀沉淀但不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn); 

   5. 將上步所得溶液和沉淀分兩次加入到吸附柱DNA Columns 中(吸附柱放入收集管中),12,000  rpm(~13,400×g)離心 30 s,棄廢液,將吸附柱重新放回收集管中;

   6. 向吸附柱中加入 600 μL Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12,000 rpm(~13,400 ×g)離心 30 s,棄廢液,將吸附柱重新放回收集管中;

注意:如吸附膜呈現(xiàn)綠色,向吸附柱中加入 500 μL 無(wú)水乙醇,12,000 rpm(~13,400×g)離心 30 s, 棄廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

   7. 重復(fù)步驟 6;

   8. 12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min,棄廢液。將吸附柱開(kāi)蓋置于室溫?cái)?shù)分鐘,以徹底晾干吸 附材料中殘余的漂洗液; 

注意:此步驟目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的殘留可能會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)實(shí)驗(yàn)(酶 切、PCR 等)。 

   9. 將吸附柱放到一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加 50~200 μL Buffer TE 或 ddH2O, 室溫放置 2~5 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min,收集 DNA 溶液,如果要增加基 因組 DNA 的得率,可以將離心得到的溶液重新加至吸附膜上,重復(fù)洗脫。將洗脫的 DNA 溶液 置于-20℃保存。 

注意:如果下游實(shí)驗(yàn)對(duì) pH 值或 EDTA 敏感,建議用 ddH2O 洗脫,若用 ddH2O 洗脫應(yīng)保證其 pH 值在7.0~8.5(可以用 NaOH 將水的 pH 值調(diào)到此范圍);若需長(zhǎng)期保存,推薦使用 Buffer TE 洗脫后置于- 20℃保存。

常見(jiàn)問(wèn)題與解決辦法 

Q1:柱子出現(xiàn)堵塞? 

A1:

   1) 樣品用量過(guò)多。建議按照說(shuō)明書(shū)推薦量進(jìn)行提?。?nbsp;

   2) 樣品富含多糖多酚類(lèi)物質(zhì)。處理富含多糖多酚的組織,推薦用專(zhuān)用試劑盒; 

   3) 離心溫度過(guò)低。本產(chǎn)品使用操作均在室溫下進(jìn)行。 

Q2:DNA 提取得率低? 

A2: 

   1) 樣品用量過(guò)少。建議按照說(shuō)明書(shū)推薦量進(jìn)行提??;

   2) 樣品材料質(zhì)量不好。盡量選用新鮮組織樣品,樣品采集后應(yīng)液氮速凍,然后置于-80℃保存,建議盡快提取,避免反復(fù)凍融; 

   3) 樣品裂解不充分。若樣品過(guò)量則適當(dāng)減少樣品量,加入 Buffer GP1 后需渦旋振蕩 1min 使其充分混勻,可適當(dāng)延長(zhǎng)裂解時(shí)間。 

Q3:提取的 DNA 中有 RNA 污染? 

A3:

   1) 未加入 RNase A 消化。請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)要求加入 RNase A 消化;

   2) 樣品中 RNA 含量過(guò)多。可適當(dāng)增加 RNase A 用量或延長(zhǎng)消化時(shí)間。