貨號
產(chǎn)品規(guī)格
售價
備注
BN16003-200T
200T
¥600.00
其他培養(yǎng)試劑
BN16003-1000T
1000T
¥2500.00
BN16003-50T
50T
¥180.00
產(chǎn)品描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
100 μL Calcein AM, 2 mM in 無水 DMSO(200T)
500 μL Calcein AM, 2 mM in 無水 DMSO(1000T)
應用范圍:活細胞熒光示蹤探針
產(chǎn)品參數(shù)
λEx/λEm (calcein) = 494/517 nm (pH 8)
儲存條件
本產(chǎn)品-20℃避光保存,推薦條件下可以保存 6 個月。
產(chǎn)品介紹
Calcein , AM 是一種對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑,它可以穿透細胞膜進入細胞,被細胞內(nèi)的酯酶剪切 Calcein。Calcein 帶高度負電荷,可以被滯留在正常細胞的 胞質(zhì)內(nèi),發(fā)出明亮的綠色熒光。由于其低毒性,Calcein , AM 可以用于研究細胞膜的完整性和長期細胞示蹤實驗。此外,它也可以被用于定量活細胞數(shù)。Calcein AM Cell Viability Assay 是在細胞活力檢測中,用來定量活細胞數(shù)的終點檢測法。試劑盒測定所產(chǎn)生的熒光信號與樣品中的活細胞數(shù)成正比(圖 1)。
圖 1. 用 Calcein AM Cell Viability Assay Kit 定量 HeLa 細胞 數(shù)。細胞在檢測前 24 h 接種于 96 孔板內(nèi)。
使用方法
1. Calcein , AM 工作液的配置
1. 從冷凍狀態(tài)下取出 Calcein , AM 儲存液原管,靜置 30 min 使其恢復至室溫。
2. 在 10 mL 的 PBS 中加入10 μL 的 2 mM Calcein, AM 儲存液,渦旋混勻,配置成 2 μM 的 Calcein, AM 工作液。
注:Calcein, AM 工作液的推薦濃度為 0.1-10 μM,最佳使用濃度由具體的細胞類型決定。2 μM 的 Calcein, AM 工作液適用于以下類型的細胞:NIH3T3, PtK2, HeLa 和 MDCK。
2. 細胞活力檢測
1. 按實驗要求將細胞接種于 96 孔培養(yǎng)板,推薦使用黑色板壁的培養(yǎng)板用于熒光檢測。對于貼壁細胞,需在檢測前一天鋪板,并設定空白對照孔。
2. 根據(jù)實驗要求對細胞進行適當處理。
3. 吸除每孔培養(yǎng)液。
注:培養(yǎng)基中的血清可能含有酯酶活性,會增強背景熒光。因而這一步操作中,可用 PBS 清洗細胞,以降低殘留血清的影響。
4. 每孔加入 100 μL 的 2 μM Calcein, AM 工作液。
5. 37℃孵育 30 min 或者更長時間。
6. 用激發(fā)波長為 485 nm,發(fā)射波長為 530 nm 的熒光檢測儀測量培養(yǎng)板內(nèi)的熒光。
注意事項
Calcein , AM 遇到濕氣會分解,使用后請在-20℃下密閉冷凍保存,防止水分進入。